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用蛋白質測定儀測定蛋白需要注意什么

來源: http://www.radiant-cloud.com  類別:實用技術  更新時間:2015-03-30  閱讀

  蛋白質是生命的物質基礎,是構成生物體細胞組織的重要成分,是生物體發育及修補組織的原料,在很多的領域中蛋白質的測量時必須的,最為明顯的是飼料中的蛋白質含量的測定,蛋白質含量的測定按照不同的原理可以分為兩大類,一是按照蛋白質的共性上來進行測量,二是利用蛋白質特中特定氨基酸殘基、酸性和堿性基團以及芳香基團等測定蛋白質的含量,在這兩種方法中又能分出很多種不同的測量方法,但是普遍使用的是凱氏定氮法,但是在各種方法在進行測定的過程,使用的儀器比較的多,耗時耗力,同時又會污染環境,而凱氏定氮儀則是按照這種原理進行研制的一款檢測儀器,這種儀器有稱之為蛋白質測定儀以及粗蛋白測定儀,通過使用這種儀器來進行測定,通過多次的測量以及分析得出以下幾個注意要點:

  1、采用蛋白質測定儀適用于半固體試樣以及液體樣品檢測,但是在進行測定的過程中對測量的范圍有一定的限制性。半固體試樣一般取樣范圍為2.00g~5.00g;液體樣品取樣10.0mL~25.0mL(約相當氮30mg~40mg)。若檢測液體樣品,結果以g/100mL表示。

  2、消化時,若樣品含糖高或含脂及較多時,注意控制加熱溫度,以免大量泡沫噴出凱氏燒瓶,造成樣品損失。可加入少量辛醇或液體石蠟,或硅消泡劑減少泡沫產生。同時應注意旋轉凱氏燒瓶,將附在瓶壁上的碳粒沖下,對樣品徹底消化。若樣品不易消化至澄清透明,可將凱氏燒瓶中溶液冷卻,加入數滴過氧化氫后,再繼續加熱消化至完全。

  3、硼酸吸收液的溫度不應超過40℃,否則氨吸收減弱,造成檢測結果偏低。可把接收瓶置于冷水浴中。

  4、在重復性條件下獲得兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的10%。

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